race技术

RACE技术的原理和操作方法？

楼主你好：RACE技术的原理和操作 近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends，RACE）是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5＇和3＇末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。经典的RACE技术是由Frohman等（1988）发明的一项技术，主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5＇和3＇端，包括单边PCR和锚定PCR。该技术提出以来经过不断发展和完善，克服了早期技术步骤多、时间长、特异性差的缺点（Frohman等，1995：Schaefer，l995： Chen，1998： Bespalova等，1998： Matz等11999）。对传统RACE技术的改进主要是引物设计及RT-PCR技术的改进：改进之一是利用锁定引物（（lock docking primer）合成第一链cDNA，即在oligo（dT）引物的3＇ 端引入两个简并的核苷酸【5＇-Oligo（dT）16-30MN-3＇，M=A/G/C；N=A/G/C/T】，使引物定位在poly（A）尾的起始点，从而消除了在合成第一条cDNA链时oligo（dT）与poly（A）尾的任何部位的结合所带来的影响；改进之二是在5＇ 端加尾时，采用poly（C），而不是poly（A）；改进之三是采用RNase H-莫洛尼氏鼠白血。病毒（MMLV）反转录酶或选择嗜热DNA聚合酶可能在高温（60℃ -70℃）有效地逆转录mRNA，从而消除了5＇端由于高CC含量导致的mRNA 二级结构对逆转录的影响；改进之四是采用热启动PCR （hot start PCR）技术和降落PCR（touch down PCR）提高PCR反应的特异性。更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考国家标准物质建材标准物质 http://www.rmhot.com/plist_1/plist_1_28_0_1.html随着RACE技术日益完善，目前己有商业化RACE技术产品推出，如CLONTECH的MarathoTM技术和SMARTTM RACE技术。邢桂春等（2001）先后使用上述两种试剂盒进行RACE反应，结果发现使用MarathonTM所得到的片断总是比采用SMARTTM RACE试剂盒到所得到的片断短。其原因在于MarathonTM技术反转录反应往往不能真正达到mRNA的5＇ 末端。所以认为，进行RACE反应应当优选SMARTTM RACE试剂盒。以下就国内目前应用最广的SMARTTM RACE试剂盒为例，简要概述RACE技术的原理和操作过程。SMARTTM 3＇-RACE的原理利用mRNA的3＇末端的poly（A）尾巴作为一个引物结合位点，以连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA.然后用一个基因特异引物GSP1（gene specific primer，GSP）作为上游引物，用一个含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为下游引物，以cDNA第一链为模板，进行PCR循环，把目的基因3＇ 末端的DNA片段扩增出来。

RACE技术的RACE技术的历史

经典的RACE技术是由Frohman等（1988）发明的一项技术，主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA 5' 和3' 端，包括单边PCR和锚定PCR。该技术提出以来经过不断发展和完善，克服了早期技术步骤多、时间长、特异性差的缺点（Frohm等，1995：Schaefer，l995： Chen，1998： Bespalova等，1998： Matz等11999）。对传统RACE技术的改进主要是引物设计及RT-PCR技术的改进：改进之一是利用锁定引物（lock docking primer）合成第一链cDNA，即在oligo(dT)引物的3' 端引入两个简并的核苷酸[5'-Oligo(dT)16-30MN-3'，M=A/G/C；N=A/G/C/T]，使引物定位在poly(A)尾的起始点，从而消除了在合成第一条cDNA链时oligo(dT)与poly(A)尾的任何部位的结合所带来的影响；改进之二是在5' 端加尾时，采用poly(C)，而不是poly(A)；改进之三是采用RNase H-莫洛尼氏鼠白血病毒（MMLV）反转录酶或选择嗜热DNA聚合酶可能在高温（60℃~70℃）有效地逆转录mRNA，从而消除了5' 端由于高CC含量导致的mRNA 二级结构对逆转录的影响；改进之四是采用热启动PCR （hot start PCR）技术和降落PCR（touch down PCR）提高PCR反应的特异性。随着RACE技术日益完善，目前己有商业化RACE技术产品推出，如CLONTECH的MarathoTM技术和SMARTTM RACE技术。邢桂春等（2001）先后使用上述两种试剂盒进行RACE反应，结果发现使用MarathonTM所得到的片断总是比采用SMARTTM RACE试剂盒到所得到的片断短。其原因在于MarathonTM技术反转录反应往往不能真正达到mRNA的5' 末端。所以认为，进行RACE反应应当优选SMARTTM RACE试剂盒。以下就国内目前应用最广的SMARTTM RACE试剂盒为例，简要概述RACE技术的原理和操作过程。

分子生物学中，3`race基因技术中的AuAp是什么？我想它是锚定引物？

所谓锚定一般在第一次的引物的基础上后退部分碱基再设计的引物，所以锚定引物连在5’端或者3’端就好理解了．可以参考下面内容对锚定引物的应用．1．　差异显示技术（mRNA　differential　display　reverse　transcription　chain　reaction　DDRT－PCR）　指在不同的生长时期、在个体的发育与分化的不同阶段、在生物体对疾病的反应以及不同的环境下调控基因的表达是不同的，这就是基因的差别表达（differential　expression）。原理：利用两组特殊的引物对差别表达的基因进行扩增。3’端引物：利用mRNA的poly　A尾巴设计。根据mRNA结构分析知道，poly　A尾巴之前的两个碱基只有12种可能的排列组合：根据这12种排列组合，设计12种不同的引物，这样就将所有mRNA分成了12组。这些引物由11～12个T及两个其它的碱基组成，用通式5’－T11MN或5’－T12MN表示，M为A、G、C的任一种，N为A、G、C、T的任一种这种引物称锚定引物。5’端引物：5’端为10个碱基（10－mer）组成的随机引物。每一个随机引物都可能与总mRNA中的某一些分子发生杂交，杂交位点也可能在mRNA的不同位点上。用一种3’锚定引物和一种5’随机引物进行扩增，可获得50～100条100～500bp的DNA扩增带。为了要寻找更多的DNA差异带，应使用全部的12种锚定引物以及尽可能多的5’随机引物。

race中文是什么意思

race 释义： n. 赛跑；竞争 n. 人种；种族；血统 v. 赛跑；竞赛读音：英 [reɪs] 美 [reɪs] 　 　单词变形：1、过去式: raced 2、过去分词: raced 3、现在分词: racing 4、第三人称单数: races双语例句：We are all involved in a rat race, whether we want to be or not.不管我们愿不愿意,我们都进行着激烈的竞争。扩展资料race近义词：tribe一、意思：n. 部落；族；一伙人二、读音：英 [traɪb]，美 [traɪb]三、例句：A council of elders governs the tribe.有个叫长老会的组织治理这个部落。四、词汇搭配：1、形容词+tribethe vagrant tribe一批流浪者2、名词+tribethe rose tribe玫瑰族

race是什么意思

race 释义： n. 赛跑；竞争 n. 人种；种族；血统 v. 赛跑；竞赛读音：英 [reɪs] 美 [reɪs] 　 　单词变形：1、过去式: raced 2、过去分词: raced 3、现在分词: racing 4、第三人称单数: races双语例句：We are all involved in a rat race, whether we want to be or not.不管我们愿不愿意,我们都进行着激烈的竞争。扩展资料：近义词1、competition　读音：英 [ˌkɒmpə'tɪʃn] 美 [ˌkɑːmpə'tɪʃn] 　 　n. 竞争；比赛Everyone in modern society faces keen competitions.现代社会的每个人都面临着激烈的竞争。2、contest　 读音：英 ['kɒntest] 美 ['kɑːntest] 　 　n. 竞赛；比赛vt. 驳斥；争取vi. 奋斗She won a gold medal for her fine performance in the contest.她在竞赛中成绩优异获金牌。